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半滑舌鳎性别特异分子标记及遗传性别鉴定技术的建立与应用

发布日期:2021-4-20    来源:本站    返回列表

       本项目采用分子标记技术、基因克隆技术、FISH技术、性逆转技术和PCR技术,对半滑舌鳎性别差异的分子基础、性别决定机制以及性别控制技术等进行了开创性研究,取得如下原创性成果:(1)采用AFLP技术,在国内外首次筛选到半滑舌鳎7个雌性特异AFLP片段,并获得了其中5个雌性特异DNA片段的核苷酸序列;(2)根据雌性特异标记的序列,设计引物,在国内外首次建立了半滑舌鳎遗传性别鉴定的PCR技术;(3)利用人工雌核发育和染色体分析技术,发现半滑舌鳎雌性具有异型性染色体,雌核发育胚胎中存在WW超雌个体,从而揭示了半滑舌鳎的性别决定机制为ZZ/ZW型;(4)采用荧光原位杂交(FISH)技术将雌性特异标记定位在W染色体上;(5)首次发现温度对半滑舌鳎鱼苗的性别分化具有影响;筛选出可以诱导半滑舌鳎鱼苗100%雄性化的雄激素浓度和时间,首次建立了大量生产半滑舌鳎遗传上雌性、生理上雄性的伪雄鱼的技术方法;(6)首次建立了半滑舌鳎分子标记辅助性别控制技术;将半滑舌鳎伪雄鱼培育成熟,产生了伪雄鱼精子,生产了半滑舌鳎伪雄鱼后代鱼苗13万尾,伪雄鱼后代鱼苗中雌性个体的比例达73%;(7 首次克隆了半滑舌鳎DMRT1P450芳香化酶基因,揭示DMRT1基因只在雄性精巢中特异表达,而P450芳香化酶基因只在卵巢和精巢中特异表达,且在卵巢中的表达水平明显高于在精巢中的表达水平;(8)本项目在国内外重要刊物上发表论文15篇,其中SCI论文6篇;申请国家发明专利4项;(9)本项成果开创了我国鱼类分子标记辅助性别控制研究的新领域,不仅对鱼类的性别决定与分化机制的研究具有重要理论意义,而且对开展半滑舌鳎等鱼类雌核发育、性别控制和全雌育种等具有重要的应用价值,大规模推广应用后必将产生巨大的社会经济效益;(10)本项目成果将我国海水鱼类性别检测和性别控制研究提升到国际领先水平,将推动我国海水鱼类单性育种技术的研究进程和养殖产业的发展。

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